实验室方法验证的技术参数选择和验证

按照GB/T 27417-2017 《合格评定 化学分析方法确认和验证指南》中的要求，方法验证过程中关键的参数应取决于方法的特性和可能测到的样品基质的检测范围,至少应测定正确度和精密度。对于痕量化学分析实验室,实验室认可还应确保获得适当的LOD（检出限）和LOQ（定量限）。通常情况下定量分析方法验证的参数选择可参考下表：

正确度验证

正确度是无穷多次重复测量所得测得的量值的平均值与一个参考量值间的一致程度。

检验正确度可采用以下几个方法：

一、是使用标准参考物质进行分析测定，比较测定值与保证值，其绝对误差或相对误差应符合方法规定的要求。

通常应完成1—2个浓度水平的有证标准物质的测定，每个浓度水平要求采用至少6份同样的标准物质进行测定，计算测定结果的平均值、标准偏差与相对标准偏差。准确度（％）=平均检测浓度／标示浓度×100。

二、是在没有有证标准物质情况下，应在样品基质中添加分析物测定回收率。应至少选择3个添加浓度，并且包含一定的浓度范围，定量限或靠近定量限的浓度为必选浓度，如果样品具有容许限，该容许限也是必选浓度。每个浓度水平至少平行测定6次，计算测量结果的平均值、标准偏差与相对标准偏差。回收率（％）=（加标试样测定值一试样测定值）／添加浓度×100。对于有机待测物，回收率指标应满足表1的要求；对于元素分析，回收率指标应在90％～110％之间。

三、是对同一样品用不同原理的分析方法测试比对。不同待测物浓度范围内回收率要求不同，

精密度的验证

精密度是指在规定条件下，相互独立的测试结果之间的一致程度。精密度包括方法重复性和方法重现性两个分指标。

重复性：是在重复性条件下，相互独立的测试结果之间的一致程度。重复性条件是指在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象取得相互独立测试结果的条件。重复性表征了该方法实验室认证内的精密度。

制定的标准方法必须进行方法的精密度试验，以考察其是否精确可靠。重复性试验过程中，选择3个不同浓度水平样品，每个浓度水平至少6次平行测定，计算出平均值、标准偏差和相对标准偏差，其相对标准偏差应符合表2要求。

 重现性：是在再现性条件下，测试结果之间的一致程度。再现性条件是在不同实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，从同一被测对象取得测试结果的条件。

再现性表征了该方法在实验室间的精密度，用来确保该方法能够在不同实验室中应用。再现性实验过程中，必须选择至少3个不同浓度水平或加标浓度水平样品，定量限或靠近定量限的浓度为必选浓度，如果样品具有容许限，该容许限也是必选浓度，平行双份，每份平行测定至少6次。

对各实验室认可的测定数据进行统计分析，计算总平均值、再现性标准差和再现性相对标准偏差。再现性相对标准偏差指标应符合表3要求。

LOD（检出限）和LOQ（定量限）的验证

LOD（检出限）和LOQ（定量限）是表征方法检测能力的两个重要指标。LOD（检出限）的确定有以下几种方式：

一、至少20次平行测定空白样品所得的平均响应信号值加上平行测定值的标准偏差的3倍，对应的样品分析物浓度或含量称为该方法的LOD（检出限）。

二、对于分光光度法，以扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值为LOD（检出限）。

三、色谱分析的检测限系指检测器恰能产生与噪声相区别的响应信号时所需要进入色谱柱的物质的最小量，一般将其定为3倍信噪比响应值对应的样品分析物浓度或含量为LOD（检出限）。

至少20次平行测定空白样品所得的平均响应信号值加上平行测定值的标准偏差的10倍，对应的样品分析物浓度或含量称该方法的（定量限）。